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來源: 發(fā)布時間:2021-12-13

Amicon? Pro純化超濾管簡明操作指南 親和純化 用于純化GST?Tag,His?Tag等重組表達蛋白及抗體,適合~0.5 mL裂解液操作 6次低速離心,總耗時~100分鐘(含65分鐘孵育時間) 1. 在Amicon? Pro上樣池中加入200μL親和純化樹脂(50%懸濁液)和1.5 mL漂洗緩沖液。 1,000×g離心1 min。 2. 加入0.5 mL樣品并與樹脂吸打混勻。孵育1 h,其間可溫和攪動促進結合。 3. 1,000×g離心1 min 以去除未結合雜質(zhì)。 4. 加入1.5 mL漂洗緩沖液,1,000×g離心1 min。 外泌體用于細胞學或動物實驗前的無菌處理 已經(jīng)經(jīng)過上述方法制備的外泌體在進行細胞或動物實驗之前還需進行一步除菌過濾,這個時候考慮到得率,應該采用離心法處理,以減少過濾時的外泌體樣品損失。 超濾方法純化具體操作步驟舉例 Amicon? Ultra-15 超濾管 (10 kDa MWCO) 用Steriflip?真空抽濾對樣品進行澄清[目錄號SCGP00525; 0.22 μm Millipore Express PLUS (PES)膜]上海超濾濃縮管供應商。無錫離心濃縮管聯(lián)系人

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Minicon?濃縮器 Minicon? 濃縮器用于在電泳或免疫電泳分析前對尿液和腦脊液進行濃縮,以增強對不正?;虿B(tài)的蛋白質(zhì)(例如尿中的 Bence Jones 蛋白)的識別。B15型有 8 個濃縮單元,用于 5mL 樣本的處理;CS15型有 10 個濃縮單元,適合 2.5mL 樣品的處理。溶劑和鹽分通過超濾被吸收劑吸收而樣品被濃縮。 優(yōu)點與應用 靜態(tài)濃縮器,不需要其它輔助裝置 濃縮倍數(shù)達到 100 倍,樣品終體積小 同時濃縮多個臨床樣品 特別推薦用于尿液、腦脊液等的蛋白 富集分析Merck離心濃縮管一級代理超濾濃縮管咨詢服務電話多少呢。

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加入漂洗緩沖液(體積是樹脂柱床體積的7.5倍)并離心。< 500μL樹脂時1,000×g離心1 min;≥ 500μL樹脂時2,000×g離心4 min。 4. 使用一個新的50 mL離心管作為收集管。 5. 加入洗脫緩沖液(體積是樹脂柱床體積的5倍)與樹脂混勻并離心。< 500μL樹脂時1,000×g離心1 min;≥ 500μL樹脂時2,000×g離心4 min。回收管中即純化好的蛋白。 6. 如果是純化抗體,在純化產(chǎn)物中加入中和緩沖液。 * 進行較大體積操作時,可以延長結合反應時間,并用膠帶密封上樣池上沿以便顛倒混勻操作。離心前去除膠帶即可。選購不帶Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管的Amicon? Pro時請使用目錄號ACS500024。

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截留 截留有時也稱為排阻。水合程度、離子和空間位置效應會導致分子量相近 的分子表現(xiàn)非常不同的截留狀態(tài)。許多生物大分子在不同的 pH 或離子強 度改變的情況下傾向于聚集或改變構象,因此其有效大小可能比 “天然” 分子大恨多,從而導致排阻增加。比如,有些蛋白質(zhì)在某些緩沖液條件下 會發(fā)生多聚化,而另一些則發(fā)生解聚(如血紅素蛋白)成亞基。這使選擇 合適截留分子量的膜變得復雜。以默克密理博的經(jīng)驗,我們通常推薦選擇 為目的分子大小一半的膜作為嘗試的優(yōu)先,再根據(jù)實際情況加以調(diào)整。超濾濃縮管服務電話是多少呢。浦東新區(qū)Merck離心濃縮管哪家優(yōu)惠

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溫和的高濃度樣品濃縮、脫鹽裝置 Amicon? stirred cells 攪拌式超濾杯 Amicon? stirred cells 攪拌式超濾裝置對于高濃度(達 百分之十)達分子溶液快速濃縮和脫鹽提供了的可行方法。做蛋白濃縮時,向超濾裝置中導入氣壓,大于超濾膜截留分子量的溶質(zhì)將被截留在容器內(nèi),水及小于超濾膜截留分子量的溶質(zhì)(如鹽分)會被過濾并排出。加壓拌式設計防止?jié)饪s的樣品發(fā)生沉淀,比離心超濾溫和,對于高濃度、易沉淀樣品的進一步濃縮同時脫鹽等應用是比較好選擇。配套選擇的超濾膜可以滅菌并經(jīng)處理后反復使用,更為經(jīng)濟。無錫離心濃縮管聯(lián)系人

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