EdU標記(a)將細胞完全培養(yǎng)基中按照500:1的比例加入EdU溶液，制成2xEdU標記培養(yǎng)基；(b)提前將2xEdU標記培養(yǎng)基預熱，然后等體積加入到細胞原有培養(yǎng)基中，獲得lxEdU溶液，其中EdU的終濃度為10uM；注：1)我們不建議替換全部培養(yǎng)基，因為這樣可能會影響細胞增殖的速度；2)配置好的培養(yǎng)基建議現用現配，用量以沒過細胞為宜；(c)每孔加入300ul含EdU培養(yǎng)基孵育細胞2小時，棄培養(yǎng)基；注：1)培養(yǎng)時間取決于細胞的增殖速度和生長狀態(tài)；2)大多數**細胞以及粘附細胞系均可采用2小時的孵育時間(d)以lxPBS清洗細胞兩次，毎次5分鐘，以除去未摻入DNA的EdU殘留。注：貼壁不牢的細胞可降低清洗強度。上海東寰向您介紹EdU細胞增殖檢測試劑盒的好處。湖北提供EdU細胞增殖檢測試劑盒供應商

細胞增殖雖然與多種因素有關，比如細胞代謝活性、與細胞增殖相關的蛋白表達、ATP的濃度等等，但是檢測細胞增殖現象的直接準確的方法就是用熒光探針直接檢測遺傳物質DNA的合成，這種方法是研究細胞增殖、信號通路、DNA修復及分化等等方向常用的方法。與傳統的免疫熒光染色(BrdU)檢測方法相比，EdU只有BrdU抗體大小的1/500，在細胞內更容易擴散，不需要嚴格的樣品變性(酸解、熱解、酶解)處理，有效地避免了樣品損傷，有助于在組織、的整體水平上觀測細胞增殖的真實情況，具有更高的靈敏度和更快的檢測速度河南如何使用EdU細胞增殖檢測試劑盒EdU細胞增殖檢測試劑盒的功能具體介紹。

細胞的固定和通透(a)每孔加入150ul4%多聚甲醛細胞固定液，室溫培養(yǎng)30分鐘，棄固定液；(b)毎孔加入150ul2mg/ml甘氨酸，搖床孵育5分鐘，以中和過量的多聚甲醛；(c)棄甘氨酸溶液，每孔加入300ulPBS洗液，室溫清洗5分鐘；(d)每孔加入300ul0.5%TritonX-100細胞通透液，室溫通透10分鐘，棄細胞通透溶液；(e)每孔加入300ulPBS洗液，室溫清洗5分鐘；該產品是采用成像檢測方法對貼壁細胞進行檢測，適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。非貼壁細胞可在孵育EdU后進行細胞涂片處理，固定后再采用貼壁細胞的染色流程進行檢測。也可以應用于流式細胞儀檢測。

這幾種方法盡管都不是檢測DNA合成的，但被用于替代[3H]thymidine摻入法。CFDASE法(C0051、C1031)基于細胞熒光示蹤的原理能檢測到單個的增殖細胞，但由于每增殖一次熒光減弱一半，在熒光顯微鏡下較難區(qū)分熒光減弱一半的細胞，檢測靈敏度不是很高，通常*適用于流式細胞儀檢測。在進行科學研究時，上述這些基于細胞活性或CFDASE的方法可以作為EdU法的補充性檢測方法。EdU(5-ethynyl-2-deoxyuridine)，中文名為5-乙炔基-2-脫氧尿苷，是一種新型胸苷(胸腺嘧啶脫氧核苷，thymidine)類似物，EdU可以在DNA合成過程中替代胸苷摻入到新合成的DNA中。EdU細胞增殖檢測試劑盒廠家。

使用本試劑盒所做結果可以用熒光顯微鏡、激光共聚焦顯微鏡、流式細胞儀或熒光酶標儀進行檢測，也可以用于高內涵篩選(High-ContentScreening,HCS)。對6孔板培養(yǎng)的細胞（每孔500μl的Click反應液）、96孔板培養(yǎng)的細胞（每孔50μl的Click反應液）、每管細胞數量為10-100萬的流式細胞儀檢測（每管500μl的Click反應液）以及冰凍或石蠟切片的檢測（每個樣品100-200μl的Click反應液），不同規(guī)格的本產品可以提供的反應的量詳見說明書中的表。光譜特性：488-Azide：綠色熒光，Ex/Em=491/518nm；Hoechst33342：藍色熒光，Ex/Em=346/460nm,boundtoDNA。EdU細胞增殖檢測試劑盒可以去哪里購買？河南如何使用EdU細胞增殖檢測試劑盒

上海東寰與您分享EdU細胞增殖檢測試劑盒發(fā)揮的重要作用。湖北提供EdU細胞增殖檢測試劑盒供應商

傳統的免疫熒光染色（BrdU）檢測方法需要DNA變性，抗原修復，抗原抗體過夜孵育，操作步驟復雜繁瑣。并且由于BrdU抗體分子較大，嵌入DNA分子中的BrdU無法直接與BrdU抗體結合，必須先進行DNA變性操作才能使BrdU抗原表位暴露，但變性的程度可能導致錯誤結果。如果變性不充分，會導致BrdU難以暴露，無法檢測，而且變性過程從邊緣向中間滲透，會導致細胞核DNA的變性不均勻，邊緣模糊不清。如果變性過分，則會導致DNA斷裂，甚至降解，導致核染不均一。另外，不同抗體試劑公司的抗體質量不一致，造成難以確保實驗重復性，且容易產生假陽性結果。湖北提供EdU細胞增殖檢測試劑盒供應商