小鼠末端補(bǔ)體復(fù)合體試劑盒操作步驟:1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品比較終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒之后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。不同類型的 Elisa 試劑盒滿足多樣需求。江陰抵抗素(RETN)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
將樣品或標(biāo)準(zhǔn)品加入孔中并孵育,如果其中存在HEVIgM抗體,這些抗體就會(huì)與HEV的多肽抗原結(jié)合,并固定在上面,洗板除去其它非特異性抗體和樣品中的其它成份。然后加入羊抗人IgM-HRP(辣根過(guò)氧化物酶)酶結(jié)合物,經(jīng)第二次孵育后,酶結(jié)合物就會(huì)與一次孵育結(jié)合上的HEVIgM抗體相結(jié)合,洗板除去未結(jié)合的酶結(jié)合物,加入TMB底物溶液,在第三次孵育時(shí)會(huì)發(fā)生酶-底物反應(yīng),只有那些含有HEVIgM抗體和酶結(jié)合物所形成的復(fù)合物的孔才會(huì)發(fā)生顏色變化,加入硫酸溶液終止酶和底物間的反應(yīng),并且在波長(zhǎng):450nm處測(cè)量O.D.值,按照本HEVIgM抗體elisa試劑盒的測(cè)試標(biāo)準(zhǔn),O.D.值大于或等于Cut-Off值的樣品被認(rèn)為是初試陽(yáng)性。臺(tái)州肌紅蛋白(MYO)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)Elisa試劑盒操作簡(jiǎn)便,結(jié)果可靠,適用于實(shí)驗(yàn)室和臨床應(yīng)用。
注意事項(xiàng)1.正式試驗(yàn)時(shí),應(yīng)分別以陽(yáng)性對(duì)照與陰性對(duì)照控制試驗(yàn)條件,待檢樣品應(yīng)作一式二份,以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時(shí)本底較高,說(shuō)明有非特異性反應(yīng),可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。2.在ELISA中,進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的,其中包括:(1)固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
試劑盒是用于盛放檢測(cè)化學(xué)成分、藥物殘留、病毒種類等化學(xué)試劑的盒子。它一般在醫(yī)院、制藥企業(yè)使用。試劑盒的產(chǎn)生正是為了使實(shí)驗(yàn)人員能夠擺脫繁重的試劑配制及優(yōu)化過(guò)程,所以試劑盒中一般配備有相應(yīng)的使用說(shuō)明書,用戶按照說(shuō)明書只需少量的優(yōu)化即可得到滿意的結(jié)果。說(shuō)明書一般包括公司標(biāo)志及名稱、試劑盒名稱、試劑盒組成、保質(zhì)期、使用領(lǐng)域、使用方法等項(xiàng)目:①一般在頁(yè)眉頁(yè)腳處為公司的名稱及標(biāo)志;②接下來(lái)為試劑盒的名稱;③試劑盒組成中應(yīng)為試劑盒中的所有內(nèi)容,為了簡(jiǎn)潔明了,一般以表格的形式表現(xiàn);④操作步驟是試劑盒說(shuō)明書中更重要的部分,內(nèi)容應(yīng)準(zhǔn)確、簡(jiǎn)潔、易懂,不能包含帶有歧義的句子,更不能含糊其辭,排版上操作步驟應(yīng)將復(fù)雜的步驟拆解,使人一目了然??梢哉f(shuō)操作步驟為試劑盒的靈魂。Elisa 試劑盒可檢測(cè)疫苗效果相關(guān)指標(biāo)。
小鼠酸脫氫酶α(PDHa)Elisa試劑盒:用抗小鼠PDHa抗體包被于酶標(biāo)板上,實(shí)驗(yàn)時(shí)標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品中的PDHa會(huì)與包被抗體結(jié)合,游離的成分被洗去。依次加入生物素化的抗小鼠PDHa抗體和辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的親和素??剐∈驪DHa抗體與結(jié)合在包被抗體上的小鼠酸脫氫酶α(PDHa)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒小鼠酸脫氫酶α(PDHa)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒結(jié)合、生物素與親和素特異性結(jié)合而形成免疫復(fù)合物,游離的成分被洗去。加入顯色的底物,TMB在辣根過(guò)氧化物酶的催化下現(xiàn)藍(lán)色,加終止液后變黃。Elisa 試劑盒可檢測(cè)遺傳疾病相關(guān)蛋白。句容B-淋巴細(xì)胞趨化因子1(BLC1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
Elisa 試劑盒可用于食品安全檢測(cè)領(lǐng)域。江陰抵抗素(RETN)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí),受檢標(biāo)本(測(cè)定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開(kāi)。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過(guò)反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果,使測(cè)定方法達(dá)到很高的敏感度。ELISA可用于測(cè)定抗原,也可用于測(cè)定抗體。江陰抵抗素(RETN)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)