定量PCR和數(shù)字PCR的特點(diǎn): 1. 在20多年的使用和發(fā)展中,定量PCR作為一種技術(shù)平臺(tái),已經(jīng)產(chǎn)出海量的數(shù)據(jù),在工業(yè)界和分子檢測(cè)的某些應(yīng)用上,定量PCR已經(jīng)成為“金標(biāo)準(zhǔn)”?;A(chǔ)研究方面,則形成了被稱為MIQE的“定量PCR標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)指南”。 2. 在定量PCR的各種應(yīng)用中,基因表達(dá)分析(gene expression analysis)的應(yīng)用比重約占七成,綜合各種因素來(lái)看,眼下定量PCR還是進(jìn)行基因表達(dá)研究的理想手段。 3. 上述的“各種因素”具體展開,主要包括:通量、自動(dòng)化程度、各種檢測(cè)探針與染料、檢測(cè)通道、成本和可參考...
要了解為什么傳統(tǒng) PCR 存在限制,務(wù)必要了解 PCR 反應(yīng)過程中發(fā)生了什么?;?PCR 運(yùn)行可以分為三個(gè)階段: 指數(shù)期 每個(gè)循環(huán)積聚的產(chǎn)物準(zhǔn)確加倍(假定 ** 反應(yīng)效率)。該反應(yīng)具有高度特異性和精確度。出現(xiàn)指數(shù)式擴(kuò)增,因?yàn)樗性噭┚迈r可用,反應(yīng)的動(dòng)力學(xué)推動(dòng)反應(yīng)有利于擴(kuò)增子加倍。 線性期(高變異性) 隨著反應(yīng)繼續(xù),一些試劑因擴(kuò)增而被消耗。反應(yīng)開始減緩,并且每個(gè)循環(huán)的 PCR 產(chǎn)物不再加倍。 平臺(tái)期(終點(diǎn):使用傳統(tǒng)方法進(jìn)行凝膠檢測(cè)) 反應(yīng)停止,不再產(chǎn)生更多產(chǎn)物,并且如果放置時(shí)間夠長(zhǎng),PCR 產(chǎn)物將...
數(shù)字PCR可以直接計(jì)算目標(biāo)序列的拷貝數(shù),因此無(wú)需依賴于對(duì)照樣品和標(biāo)準(zhǔn)曲線就可以進(jìn)行精確的***定量檢測(cè);此外,由于數(shù)字PCR在進(jìn)行結(jié)果判讀時(shí)*判斷有/無(wú)兩種擴(kuò)增狀態(tài),因此也不需要檢測(cè)熒光信號(hào)與設(shè)定閾值線的交點(diǎn),完全不依賴于Ct值的鑒定,因此數(shù)字PCR的反應(yīng)受擴(kuò)增效率的影響**降低,對(duì)PCR反應(yīng)***物的耐受能力**提高;數(shù)字PCR實(shí)驗(yàn)中標(biāo)準(zhǔn)反應(yīng)體系分配的過程可以極大程度上降低與目標(biāo)序列有競(jìng)爭(zhēng)性作用的背景序列濃度,因此數(shù)字PCR技術(shù)也特別適合在復(fù)雜背景中檢測(cè)稀有突變。支持多重?cái)?shù)字PCR,可選全中文分析軟件。寧波廣州永諾數(shù)字PCR哪家好 數(shù)字PCR(Digtal PC...
研究方向 病原微生物的檢測(cè)(***、細(xì)菌等) 疾病預(yù)防控制中心、出入境檢驗(yàn)檢疫局系統(tǒng)的實(shí)驗(yàn)室目前主要采用基于TaqMan探針法的定量PCR體系對(duì)病原微生物進(jìn)行核酸水平的檢測(cè),而這些目前正在使用著的檢測(cè)體系可以無(wú)縫地轉(zhuǎn)移到QX200上,從而滿足該類實(shí)驗(yàn)室對(duì)于檢測(cè)結(jié)果的要求:靈敏度更高、重復(fù)性更好、無(wú)需依賴標(biāo)準(zhǔn)曲線的***定量結(jié)果,同時(shí)操作簡(jiǎn)便。 對(duì)于其他類型的研究實(shí)驗(yàn)室,也可以利用ddPCR靈敏度高的特點(diǎn),對(duì)各種樣品中的病原微生物展開***的研究。如HIV抗逆轉(zhuǎn)錄***治療過程中***殘留量的監(jiān)控;HBV耐藥突變...
定量PCR和數(shù)字PCR的特點(diǎn): 5. 目前定量PCR已經(jīng)能實(shí)現(xiàn)高通量樣品條件下的自動(dòng)化操作。 6. 數(shù)字PCR在單分子層面上的***定量,可以徹底擺脫對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線的依賴而直接給出靶序列的拷貝數(shù),提高了實(shí)驗(yàn)結(jié)果在批內(nèi)和批間的穩(wěn)定性,甚至能用來(lái)對(duì)標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行定標(biāo)。 7. 基于***定量的方式,數(shù)字PCR結(jié)果的高重復(fù)性和高精度可實(shí)現(xiàn)微小差異的基因表達(dá)分析,如等位基因的不平衡表達(dá)、單細(xì)胞基因表達(dá)分析、microRNA表達(dá)分析等等。所謂“微小差異”的標(biāo)準(zhǔn)一般而言是指表達(dá)水平的差異在2倍以內(nèi)。 ...
數(shù)字PCR也叫Digital PCR(dPCR),是近幾年發(fā)展起來(lái)的一種核酸定量分析技術(shù)。相較于傳統(tǒng)熒光定量PCR來(lái)說(shuō),數(shù)字PCR對(duì)結(jié)果的判定不依賴于擴(kuò)增曲線循環(huán)Ct值,不受擴(kuò)增效率的影響,能夠直接讀出DNA的分子個(gè)數(shù),能夠?qū)ζ鹗紭颖竞怂岱肿?**定量。 數(shù)字PCR基本原理是將一個(gè)樣本分成幾十到幾萬(wàn)份,然后再將其分配到不同的反應(yīng)單元中,使每個(gè)微滴單元包含一個(gè)或多個(gè)拷貝的核酸分子(即DNA模板),每個(gè)單元都會(huì)對(duì)目標(biāo)分子進(jìn)行擴(kuò)增,然后再對(duì)每個(gè)單元進(jìn)行熒光信號(hào)的統(tǒng)計(jì)并計(jì)算。相對(duì)而言,傳統(tǒng)PCR或qPCR反應(yīng)都是發(fā)生于同一體系當(dāng)中,這也是數(shù)字...
要了解為什么傳統(tǒng) PCR 存在限制,務(wù)必要了解 PCR 反應(yīng)過程中發(fā)生了什么?;?PCR 運(yùn)行可以分為三個(gè)階段: 指數(shù)期 每個(gè)循環(huán)積聚的產(chǎn)物準(zhǔn)確加倍(假定 ** 反應(yīng)效率)。該反應(yīng)具有高度特異性和精確度。出現(xiàn)指數(shù)式擴(kuò)增,因?yàn)樗性噭┚迈r可用,反應(yīng)的動(dòng)力學(xué)推動(dòng)反應(yīng)有利于擴(kuò)增子加倍。 線性期(高變異性) 隨著反應(yīng)繼續(xù),一些試劑因擴(kuò)增而被消耗。反應(yīng)開始減緩,并且每個(gè)循環(huán)的 PCR 產(chǎn)物不再加倍。 平臺(tái)期(終點(diǎn):使用傳統(tǒng)方法進(jìn)行凝膠檢測(cè)) 反應(yīng)停止,不再產(chǎn)生更多產(chǎn)物,并且如果放置時(shí)間夠長(zhǎng),PCR 產(chǎn)物將...
數(shù)字PCR(d PCR)是近年來(lái)引起重視并迅速發(fā)展起來(lái)的一種突破性的核酸定量分析技術(shù)。該技術(shù)先將核酸模板進(jìn)行稀釋,分配到大量**的反應(yīng)單元中,使每個(gè)反應(yīng)單元中只有單個(gè)模板分子,然后進(jìn)行PCR擴(kuò)增反應(yīng),擴(kuò)增結(jié)束后對(duì)每個(gè)反應(yīng)室的熒光信號(hào)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,來(lái)定量DNA拷貝數(shù)。數(shù)字PCR采用先擴(kuò)增后定量,因此不依賴擴(kuò)增曲線的循環(huán)閾值(Ct),也無(wú)需采用內(nèi)參基因和標(biāo)準(zhǔn)曲線,準(zhǔn)確度高、重現(xiàn)性好,可以實(shí)現(xiàn)***定量分析。由于其獨(dú)特的技術(shù)優(yōu)勢(shì),已經(jīng)在臨床診斷、轉(zhuǎn)基因成分定量、單細(xì)胞基因表達(dá)分析、環(huán)境微生物檢測(cè)和下一代測(cè)序等研究領(lǐng)域顯示出巨大的優(yōu)勢(shì)和應(yīng)用前景。高靈敏度——數(shù)字PCR的靈敏度與同體積反...
數(shù)字PCR也叫Digital PCR(dPCR),是近幾年發(fā)展起來(lái)的一種核酸定量分析技術(shù)。相較于傳統(tǒng)熒光定量PCR來(lái)說(shuō),數(shù)字PCR對(duì)結(jié)果的判定不依賴于擴(kuò)增曲線循環(huán)Ct值,不受擴(kuò)增效率的影響,能夠直接讀出DNA的分子個(gè)數(shù),能夠?qū)ζ鹗紭颖竞怂岱肿?**定量。 數(shù)字PCR基本原理是將一個(gè)樣本分成幾十到幾萬(wàn)份,然后再將其分配到不同的反應(yīng)單元中,使每個(gè)微滴單元包含一個(gè)或多個(gè)拷貝的核酸分子(即DNA模板),每個(gè)單元都會(huì)對(duì)目標(biāo)分子進(jìn)行擴(kuò)增,然后再對(duì)每個(gè)單元進(jìn)行熒光信號(hào)的統(tǒng)計(jì)并計(jì)算。相對(duì)而言,傳統(tǒng)PCR或qPCR反應(yīng)都是發(fā)生于同一體系當(dāng)中,這也是數(shù)字PCR與其比較大的區(qū)別...
微滴式數(shù)字PCR系統(tǒng)在傳統(tǒng)的PCR擴(kuò)增前對(duì)樣品進(jìn)行微滴化處理,即將含有核酸分子的反應(yīng)體系分成成千上萬(wàn)個(gè)納升級(jí)的微滴,其中每個(gè)微滴或不含待檢核酸靶分子,或者含有一個(gè)至數(shù)個(gè)待檢核酸靶分子。經(jīng)PCR擴(kuò)增后,逐個(gè)對(duì)每個(gè)微滴進(jìn)行檢測(cè),有熒光信號(hào)的微滴判讀為1,沒有熒光信號(hào)的微滴判讀為0,根據(jù)泊松分布原理及陽(yáng)性微滴的個(gè)數(shù)與比例即可得出靶分子的起始拷貝數(shù)或濃度。 與傳統(tǒng)PCR相比所具有的優(yōu)勢(shì) 不依賴Ct值或內(nèi)參基因,即可確定低至單拷貝的待檢靶分子的***數(shù)目。微滴技術(shù)讓數(shù)字PCR更低成本,且更實(shí)用。 雙通道熒光檢測(cè),支持Ev...
微滴式數(shù)字PCR系統(tǒng)為微流控微滴生成技術(shù),采用原創(chuàng)性的油液,單個(gè)樣本在微米級(jí)流道中利用氣壓驅(qū)動(dòng)在3分鐘內(nèi)生成10萬(wàn)微滴,單次運(yùn)行生成80萬(wàn)微滴,微滴體積達(dá)皮升級(jí),檢測(cè)線性范圍達(dá)到6個(gè)數(shù)量級(jí),各項(xiàng)指標(biāo)均超越國(guó)內(nèi)外主流產(chǎn)品。 在液滴生成數(shù)上,MicroDrop?能達(dá)到國(guó)外同級(jí)別產(chǎn)品的5倍。與此同時(shí),設(shè)備制作成本只有國(guó)外同類產(chǎn)品的一半。這減低了精細(xì)醫(yī)療的成本,打破了國(guó)外廠商在微滴式數(shù)字PCR領(lǐng)域的壟斷。這意味著在未來(lái),采用外周血、唾液、尿液、腦脊液等樣本進(jìn)行低成本、高靈敏、快速的無(wú)創(chuàng)檢測(cè)成為可能。 采用主流可靠的解決方案,由微滴生成儀、微滴檢測(cè)儀...
數(shù)字PCR的應(yīng)用 檢驗(yàn)檢疫 食品安全 ?轉(zhuǎn)基因食品檢測(cè)(國(guó)標(biāo)) ?病原菌鑒定 ?動(dòng)物源性檢測(cè)分析 科研 ?基因表達(dá)差異監(jiān)測(cè) ?CRISPR-Cas9基因編輯結(jié)果驗(yàn)證 ?甲基化含量鑒定 ?單細(xì)胞研究:測(cè)序、PCR 臨床 ?**液體活檢:早篩、用藥、監(jiān)測(cè)、復(fù)發(fā) ?無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前篩查:低成本、快速 ?***性疾病:HBV、HIV定量 據(jù)悉,MiniDrop?**團(tuán)隊(duì)由微流控、光學(xué)、機(jī)電學(xué)、化學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)、分子生物學(xué)等多學(xué)科交叉領(lǐng)域的**組成,依托精密儀器研發(fā)、生物...
研究方向基因表達(dá)差異研究 檢測(cè)時(shí)完全不依賴傳統(tǒng)的Ct值即可實(shí)現(xiàn)真正意義上的***定量,從而提供了比實(shí)時(shí)熒光定量PCR更精確的基因差異表達(dá)研究,尤其對(duì)于那些靶基因表達(dá)差異微小的情況:microRNA、lncRNAs等的表達(dá)分析、等位基因的不平衡表達(dá)、單細(xì)胞基因表達(dá)分析、Exosome內(nèi)核酸分子定量分析等。 拷貝數(shù)變異(CNV)研究 微滴化的樣品處理及檢測(cè),這種擺脫Ct值的計(jì)算方法而直接獲取目標(biāo)基因的***拷貝數(shù),為拷貝數(shù)變異的研究提供了***的檢測(cè)精度。是其他諸如二代測(cè)序、芯片雜交等平臺(tái)無(wú)法達(dá)到的,因此采用數(shù)字PCR能夠有效對(duì)NGS、aCGH的實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行驗(yàn)...
MiniDrop數(shù)字PCR儀由Creator微滴生成儀、Detector微滴檢測(cè)儀、MD Microchip微流控芯片及MD Plotter數(shù)據(jù)分析軟件組成,該系統(tǒng)的**為微流控微滴生成技術(shù),采用原創(chuàng)性的油液,在40um微管道中利用氣壓驅(qū)動(dòng)在2分鐘內(nèi)生成50萬(wàn)微滴,單次運(yùn)行生成400萬(wàn)微滴,微滴體積達(dá)皮升級(jí),檢測(cè)線性范圍達(dá)到5個(gè)數(shù)量級(jí),各項(xiàng)指標(biāo)均超越國(guó)內(nèi)外的主流產(chǎn)品。 MiniDrop創(chuàng)新性采用高壓驅(qū)動(dòng)的方法將樣本分割成50萬(wàn)份,打破了國(guó)外廠商在微滴式數(shù)字PCR領(lǐng)域的壟斷。 檢測(cè)靈敏度高達(dá)萬(wàn)分之一。杭州永諾數(shù)字PCR價(jià)格 二代測(cè)序輔...
MicroDrop-100微滴式數(shù)字PCR 應(yīng)用范圍如下: a. 動(dòng)植物檢驗(yàn)檢疫,動(dòng)物源性分析、極微量病原菌檢測(cè)定量分析、轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測(cè); b. 降低篩查成本、縮短檢測(cè)周期,適用于T13\T18\T21三體綜合征等遺傳病的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估;適用于zhong瘤早期篩查、分子分型、靶向用藥和療效監(jiān)測(cè)等;適用于傳染性疾病的早期診斷和診療指導(dǎo); c. 可用于DNA甲基化的檢測(cè)、CRISPR-Cas9基因編輯效率檢測(cè)等。 d.基因表達(dá)差異監(jiān)測(cè)單細(xì)胞研究:測(cè)序、PCR e.無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前篩查:低成本、快速、傳染性疾病:HBV、HIV、COVID-19 定量 單張芯片一次可處理8個(gè)樣本。...
要了解為什么傳統(tǒng) PCR 存在限制,務(wù)必要了解 PCR 反應(yīng)過程中發(fā)生了什么?;?PCR 運(yùn)行可以分為三個(gè)階段: 指數(shù)期 每個(gè)循環(huán)積聚的產(chǎn)物準(zhǔn)確加倍(假定 ** 反應(yīng)效率)。該反應(yīng)具有高度特異性和精確度。出現(xiàn)指數(shù)式擴(kuò)增,因?yàn)樗性噭┚迈r可用,反應(yīng)的動(dòng)力學(xué)推動(dòng)反應(yīng)有利于擴(kuò)增子加倍。 線性期(高變異性) 隨著反應(yīng)繼續(xù),一些試劑因擴(kuò)增而被消耗。反應(yīng)開始減緩,并且每個(gè)循環(huán)的 PCR 產(chǎn)物不再加倍。 平臺(tái)期(終點(diǎn):使用傳統(tǒng)方法進(jìn)行凝膠檢測(cè)) 反應(yīng)停止,不再產(chǎn)生更多產(chǎn)物,并且如果放置時(shí)間夠長(zhǎng),PCR 產(chǎn)物將...
要了解為什么傳統(tǒng) PCR 存在限制,務(wù)必要了解 PCR 反應(yīng)過程中發(fā)生了什么。基本 PCR 運(yùn)行可以分為三個(gè)階段: 指數(shù)期 每個(gè)循環(huán)積聚的產(chǎn)物準(zhǔn)確加倍(假定 ** 反應(yīng)效率)。該反應(yīng)具有高度特異性和精確度。出現(xiàn)指數(shù)式擴(kuò)增,因?yàn)樗性噭┚迈r可用,反應(yīng)的動(dòng)力學(xué)推動(dòng)反應(yīng)有利于擴(kuò)增子加倍。 線性期(高變異性) 隨著反應(yīng)繼續(xù),一些試劑因擴(kuò)增而被消耗。反應(yīng)開始減緩,并且每個(gè)循環(huán)的 PCR 產(chǎn)物不再加倍。 平臺(tái)期(終點(diǎn):使用傳統(tǒng)方法進(jìn)行凝膠檢測(cè)) 反應(yīng)停止,不再產(chǎn)生更多產(chǎn)物,并且如果放置時(shí)間夠長(zhǎng),PCR 產(chǎn)物將...
在定量PCR時(shí),我們常常糾結(jié)一個(gè)問題,究竟是相對(duì)定量還是***定量呢?如今,你無(wú)需糾結(jié)了,因?yàn)閿?shù)字PCR(digital PCR)來(lái)了。盡管這兩種技術(shù)有些類似,都是估計(jì)起始樣品中的核酸量,但它們有一個(gè)重要的區(qū)別。定量PCR是依靠標(biāo)準(zhǔn)曲線或參照基因來(lái)測(cè)定核酸量,而數(shù)字PCR則讓你能夠直接數(shù)出DNA分子的個(gè)數(shù),是對(duì)起始樣品的***定量。因此特別適用于依靠Ct值不能很好分辨的應(yīng)用領(lǐng)域:拷貝數(shù)變異、突變檢測(cè)、基因相對(duì)表達(dá)研究(如等位基因不平衡表達(dá))、二代測(cè)序結(jié)果驗(yàn)證、miRNA表達(dá)分析、單細(xì)胞基因表達(dá)分析等。單次微滴生成*需2分鐘。常州廣東數(shù)字PCR報(bào)價(jià) 定量PCR和數(shù)字PCR的...
基因檢測(cè)**前沿的兩種方法是:高通量測(cè)序(NGS)和數(shù)字PCR (dPCR)。 高通量測(cè)序技術(shù)又稱“下一代”測(cè)序技術(shù),可以一次對(duì)幾十萬(wàn)到幾百萬(wàn)條DNA分子進(jìn)行序列測(cè)定,功能強(qiáng)大,但是實(shí)驗(yàn)操作較復(fù)雜,數(shù)據(jù)分析難度較大,檢測(cè)周期長(zhǎng),成本較高。數(shù)字PCR技術(shù)是目前**精細(xì)**靈敏的基因檢測(cè)技術(shù),借助微液滴或微腔室,通過單個(gè)模板分子的PCR擴(kuò)增,可實(shí)現(xiàn)不依賴于標(biāo)準(zhǔn)曲線和參照樣本的***定量。與NGS相比,數(shù)字PCR靈敏度高、檢測(cè)速度快、操作簡(jiǎn)便、結(jié)果易讀、成本低廉等優(yōu)勢(shì)使其更適合臨床檢測(cè),成為精細(xì)醫(yī)療實(shí)現(xiàn)平民化、大眾化的比較好選擇。 ...
MicroDrop-100微滴式數(shù)字PCR 應(yīng)用范圍如下: a. 動(dòng)植物檢驗(yàn)檢疫,動(dòng)物源性分析、極微量病原菌檢測(cè)定量分析、轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測(cè); b. 降低篩查成本、縮短檢測(cè)周期,適用于T13\T18\T21三體綜合征等遺傳病的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估;適用于zhong瘤早期篩查、分子分型、靶向用藥和療效監(jiān)測(cè)等;適用于傳染性疾病的早期診斷和診療指導(dǎo); c. 可用于DNA甲基化的檢測(cè)、CRISPR-Cas9基因編輯效率檢測(cè)等。 d.基因表達(dá)差異監(jiān)測(cè)單細(xì)胞研究:測(cè)序、PCR e.無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前篩查:低成本、快速、傳染性疾?。篐BV、HIV、COVID-19 定量 MicroDrop?數(shù)字PC...
微滴式數(shù)字PCR系統(tǒng)在傳統(tǒng)的PCR擴(kuò)增前對(duì)樣品進(jìn)行微滴化處理,即將含有核酸分子的反應(yīng)體系分成成千上萬(wàn)個(gè)納升級(jí)的微滴,其中每個(gè)微滴或不含待檢核酸靶分子,或者含有一個(gè)至數(shù)個(gè)待檢核酸靶分子。經(jīng)PCR擴(kuò)增后,逐個(gè)對(duì)每個(gè)微滴進(jìn)行檢測(cè),有熒光信號(hào)的微滴判讀為1,沒有熒光信號(hào)的微滴判讀為0,根據(jù)泊松分布原理及陽(yáng)性微滴的個(gè)數(shù)與比例即可得出靶分子的起始拷貝數(shù)或濃度。 與傳統(tǒng)PCR相比所具有的優(yōu)勢(shì) 不依賴Ct值或內(nèi)參基因,即可確定低至單拷貝的待檢靶分子的***數(shù)目。微滴技術(shù)讓數(shù)字PCR更低成本,且更實(shí)用。 支持多重?cái)?shù)字PCR,可選...
MiniDrop數(shù)字PCR儀由Creator微滴生成儀、Detector微滴檢測(cè)儀、MD Microchip微流控芯片及MD Plotter數(shù)據(jù)分析軟件組成,該系統(tǒng)的**為微流控微滴生成技術(shù),采用原創(chuàng)性的油液,在40um微管道中利用氣壓驅(qū)動(dòng)在2分鐘內(nèi)生成50萬(wàn)微滴,單次運(yùn)行生成400萬(wàn)微滴,微滴體積達(dá)皮升級(jí),檢測(cè)線性范圍達(dá)到5個(gè)數(shù)量級(jí),各項(xiàng)指標(biāo)均超越國(guó)內(nèi)外的主流產(chǎn)品。 MiniDrop創(chuàng)新性采用高壓驅(qū)動(dòng)的方法將樣本分割成50萬(wàn)份,打破了國(guó)外廠商在微滴式數(shù)字PCR領(lǐng)域的壟斷。 全封閉防污染設(shè)計(jì),一鍵式自動(dòng)化操作。廣州國(guó)產(chǎn)數(shù)字PCR正規(guī)代...
MicroDrop-100微滴式數(shù)字PCR是具有國(guó)內(nèi)自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的第三代JUE對(duì)定量PCR系統(tǒng),整套系統(tǒng)由MicroDrop-100A微滴生成儀、 MicroDrop-100B微滴檢測(cè)儀以及結(jié)果數(shù)據(jù)分析設(shè)備等構(gòu)成。系統(tǒng)通過自主設(shè)計(jì)的微流控芯片,利用油水相不兼容的原理,在2分鐘時(shí)間內(nèi)將PCR體系分割成100,000油包水的體系,每個(gè)體系為**的PCR反應(yīng)體系,體積約為0.2nL,單次實(shí)驗(yàn)一次可生成8個(gè)樣本的油包水體系。由于油包水體系的分割效應(yīng),使得數(shù)字PCR受PCRYi制物的影響相對(duì)較小,有利于復(fù)雜環(huán)境樣本的實(shí)驗(yàn)操作。區(qū)別于熒光定量PCR的過程性判讀方法,數(shù)字PCR結(jié)果判讀為終點(diǎn)法...
CNV(Copy Number Variations,拷貝數(shù)變異)研究需要極高的定量精度以區(qū)別不同拷貝數(shù)之間的微小差異,測(cè)序方法適用于高于30%的變異率檢測(cè),而qPCR的比較**辨在1.5倍左右,數(shù)字PCR通過直接計(jì)數(shù)目標(biāo)基因與參照基因( 拷貝數(shù)為1的基因,例如RNaseP) 的數(shù)目,計(jì)算比值,直接得到目標(biāo)基因的拷貝數(shù)可以達(dá)到極高的拷貝數(shù)分辨精度。 除此之外,dPCR在病原微生物檢測(cè)、microRNA研究、基因表達(dá)研究、NGS測(cè)序文庫(kù)的***定量、表觀遺傳學(xué)直接相關(guān)的DNA甲基化定量檢測(cè)、ChIP定量鑒定等領(lǐng)域的應(yīng)用都令人極為期待,而在轉(zhuǎn)基因成分鑒...
MicroDrop-100微滴式數(shù)字PCR 應(yīng)用范圍如下: a. 動(dòng)植物檢驗(yàn)檢疫,動(dòng)物源性分析、極微量病原菌檢測(cè)定量分析、轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測(cè); b. 降低篩查成本、縮短檢測(cè)周期,適用于T13\T18\T21三體綜合征等遺傳病的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估;適用于zhong瘤早期篩查、分子分型、靶向用藥和療效監(jiān)測(cè)等;適用于傳染性疾病的早期診斷和診療指導(dǎo); c. 可用于DNA甲基化的檢測(cè)、CRISPR-Cas9基因編輯效率檢測(cè)等。 d.基因表達(dá)差異監(jiān)測(cè)單細(xì)胞研究:測(cè)序、PCR e.無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前篩查:低成本、快速、傳染性疾病:HBV、HIV、COVID-19 定量 FAM、VIC雙通道熒光檢測(cè)...
定量PCR和數(shù)字PCR的特點(diǎn): 5. 目前定量PCR已經(jīng)能實(shí)現(xiàn)高通量樣品條件下的自動(dòng)化操作。 6. 數(shù)字PCR在單分子層面上的***定量,可以徹底擺脫對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線的依賴而直接給出靶序列的拷貝數(shù),提高了實(shí)驗(yàn)結(jié)果在批內(nèi)和批間的穩(wěn)定性,甚至能用來(lái)對(duì)標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行定標(biāo)。 7. 基于***定量的方式,數(shù)字PCR結(jié)果的高重復(fù)性和高精度可實(shí)現(xiàn)微小差異的基因表達(dá)分析,如等位基因的不平衡表達(dá)、單細(xì)胞基因表達(dá)分析、microRNA表達(dá)分析等等。所謂“微小差異”的標(biāo)準(zhǔn)一般而言是指表達(dá)水平的差異在2倍以內(nèi)。 ...
要了解為什么傳統(tǒng) PCR 存在限制,務(wù)必要了解 PCR 反應(yīng)過程中發(fā)生了什么。基本 PCR 運(yùn)行可以分為三個(gè)階段: 指數(shù)期 每個(gè)循環(huán)積聚的產(chǎn)物準(zhǔn)確加倍(假定 ** 反應(yīng)效率)。該反應(yīng)具有高度特異性和精確度。出現(xiàn)指數(shù)式擴(kuò)增,因?yàn)樗性噭┚迈r可用,反應(yīng)的動(dòng)力學(xué)推動(dòng)反應(yīng)有利于擴(kuò)增子加倍。 線性期(高變異性) 隨著反應(yīng)繼續(xù),一些試劑因擴(kuò)增而被消耗。反應(yīng)開始減緩,并且每個(gè)循環(huán)的 PCR 產(chǎn)物不再加倍。 平臺(tái)期(終點(diǎn):使用傳統(tǒng)方法進(jìn)行凝膠檢測(cè)) 反應(yīng)停止,不再產(chǎn)生更多產(chǎn)物,并且如果放置時(shí)間夠長(zhǎng),PCR 產(chǎn)物將...
無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前檢查 鐮狀細(xì)胞貧血(sickle cell anemia)是HBB基因突變引起的常染色體顯性遺傳病,有嚴(yán)重的危害,可以導(dǎo)致高達(dá)5%的胎兒死亡率及4.62%的孕婦死亡率。而精細(xì)有效的無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前診斷是預(yù)防鐮狀細(xì)胞貧血患兒出生的有效方法。研究人員采用dPCR技術(shù)檢測(cè)孕婦胎兒游離DNA(cff-DNA)HBB基因突變。結(jié)果顯示,dPCR技術(shù)能夠確定87%的男性胎兒(n=45)和75%的女性胎兒(n=20)HBB基因的突變狀態(tài)。當(dāng)cff-DNA濃度大于7%時(shí),可以**的檢測(cè)出HBB基因突變[3],可以說(shuō)是相當(dāng)厲害了。 開放式平臺(tái),支持用戶自行開發(fā)試劑、產(chǎn)品。南通廣東...
相對(duì)于二代測(cè)序、基因芯片和定量PCR而言,數(shù)字PCR具備以下優(yōu)勢(shì): · 能夠有效區(qū)分濃度差異微小的樣品:更好的準(zhǔn)確度、精密度和重復(fù)性,可以用于精確測(cè)定靶基因的相對(duì)表達(dá),基因拷貝數(shù)變異分析等。 · 數(shù)字PCR可開發(fā)針對(duì)不同**、不同樣本以及不同的樣本環(huán)境提供檢測(cè)解決方案,該技術(shù)的應(yīng)用范圍廣,尤其在液體活檢領(lǐng)域,已開發(fā)針對(duì)肺*、乳腺*、腸*、胃*等上百個(gè)位點(diǎn)檢測(cè)試劑盒,可精細(xì)指導(dǎo)臨床***的診斷,以便患者在后續(xù)得到更及時(shí)并且適當(dāng)?shù)?**方案提供。 數(shù)字PCR技術(shù)是公認(rèn)的液體活檢領(lǐng)域靈敏度比較好的檢測(cè)方法。無(wú)錫廣州永諾數(shù)字PCR價(jià)格 無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前檢查 ...
我國(guó)***擁有完全自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的微滴式數(shù)字PCR儀MiniDrop?研發(fā)成功并投入生產(chǎn)。這是國(guó)內(nèi)***微滴式數(shù)字PCR檢測(cè)系統(tǒng),能廣泛應(yīng)用于醫(yī)療、農(nóng)業(yè)、環(huán)境等領(lǐng)域,未來(lái),采用外周血、唾液、尿液、腦脊液等樣本進(jìn)行低成本、高靈敏、快速的無(wú)創(chuàng)檢測(cè)成為可能。 MiniDrop?數(shù)字PCR儀由Creator微滴生成儀、Detector微滴檢測(cè)儀、MD Microchip微流控芯片及MD Plotter數(shù)據(jù)分析軟件組成,該系統(tǒng)的**為微流控微滴生成技術(shù),采用原創(chuàng)性的油液,在40um微管道中利用氣壓驅(qū)動(dòng)在2分鐘內(nèi)生成50萬(wàn)微滴,單次運(yùn)行生成400萬(wàn)微滴,微滴體...