**近一項與抗血管生成基因傳遞高度相關的發(fā)現(xiàn)是，陽離子脂質體（CLs）選擇性地靶向**的血管系統(tǒng)。陰離子或電中性脂質體沒有發(fā)現(xiàn)這種作用。Campbell和他的同事[95]發(fā)現(xiàn)，與電中性脂質體相比，使用CLs在**血管內(nèi)皮細胞(VECs)中積累更多，CLs通過添加5mol%聚乙二醇來穩(wěn)定。在兩種人類**類型(LS174T和MCAIV)和兩個位置(顱窗和背側皮膚褶腔)中發(fā)現(xiàn)了**VECs的選擇性遞送。**血管中囊泡的分布是不均勻的，這可能與該技術是否足以根除足夠數(shù)量的**VECs以實現(xiàn)**消退反應有關。有趣的是，注射后24小時，脂質體上50%的摩爾電荷***增加了小鼠肺部的積聚。PHP是由天然來源的羥基脯氨酸(如膠原蛋白、明膠和其他蛋白質)制成的，是一個用作基因載體的聚酯。河北DOTAP 轉染試劑

核酸與轉染試劑的比例對轉染效率也有影響。在一項涉及原代人成肌細胞的研究中，使用不同的核酸比例來比較轉染效率的影響，轉染試劑包括FuGENE6、Effectene和ExGen500(一種基于pei的試劑)。該研究的一個***發(fā)現(xiàn)是，轉染效率可能不一定與所用試劑的體積直接相關。例如，2μgDNA與5μLFuGENE6試劑的比例被證明可以產(chǎn)生比較好的轉染效率，而更低或更高的DNA與試劑的比例并不能提高效率。在另一項涉及轉染人胃腺*細胞系的研究中也觀察到類似的發(fā)現(xiàn)，即在一系列組合中使用比較高轉染試劑與DNA比體積測試時，轉染效率并未達到比較好。使用不成比例的高轉染試劑量會導致不必要的細胞毒性，從而降低整體轉染結果。因此，確定合適的核酸與試劑比例是啟動新的轉染研究以實現(xiàn)高轉染效率和低細胞毒性的重要步驟。新疆轉染試劑優(yōu)惠評估轉染效率至關重要，特別是在需要高轉染效率以保證特定下游靶標轉錄后調控的功能研究中。

隨著寡核苷酸生物合成產(chǎn)業(yè)的發(fā)展，不同類型的修飾寡核苷酸也被引入市場，以提高小RNA寡核苷酸轉染的效率。其中一種是通過化學修飾來提高其與靶標和阻斷外切酶活性的結合親和力的agomirs和antagomirs。agomir是一種人工修飾的雙鏈miRNA模擬物，旨在發(fā)揮比傳統(tǒng)miRNA模擬物更高的靶標抑制活性(krtzfeldt另一方面，antagomir是一種專門設計的單鏈miRNA類似物，旨在抑制特定的miRNA。agomir和antagomir都被認為更穩(wěn)定、更有效、更特異，而且與正常的模擬物或拮抗劑相比，對宿主細胞膜具有更高的結合親和力。鎖定核酸(LNA)是另一種修飾的寡核苷酸，其至少一個核苷酸具有額外的亞甲基橋，以增強其核糖環(huán)結構的穩(wěn)定性。其鎖定的核糖結構使得LNA比常用的寡核苷酸更短，從而使其比傳統(tǒng)的寡核苷酸表現(xiàn)出更高的效率、穩(wěn)定性和結合親和力。NA基寡核苷酸的應用已被報道用于各種生化或功能分析，涉及遞送小RNA分子，如siRNA、miRNA和piRNA。一些基于NA基的轉染不需要轉染試劑，這可以比較大限度地減少轉染過程中試劑的二次效應。

超聲輔助轉染涉及在宿主細胞膜上制造微小的孔，以促進核酸(包括DNA和RNA)的傳遞。與前一種策略類似，超聲照射的暴露時間、脈沖數(shù)和密度也被報道與轉染效率成比例相關，直至達到閾值。超過耐受極限，細胞存活率和轉染效率可能會下降。同樣，增加核酸的數(shù)量也可以提高超聲輔助轉染的轉染效率。在同一項研究中，超聲轉染懸浮培養(yǎng)的人293T細胞比轉染貼壁培養(yǎng)的相同細胞類型更容易。然而，這一觀察結果與另一項研究的結果不一致，該研究報告在懸浮或單層條件下培養(yǎng)的轉染大鼠細胞數(shù)量沒有***差異。值得注意的是，后一項研究還報道了單層培養(yǎng)的大鼠細胞在轉染后保持較高的細胞活力。然而，這兩項研究的不一致結果表明，超聲穿孔的比較好培養(yǎng)條件可能因使用的細胞系不同而異。在另一項研究中表明超聲轉染效率因使用的細胞類型而異，Hela和T-24細胞系的超聲轉染效率優(yōu)于PC-3、U937和Meth A細胞系。因此，細胞類型的選擇是影響超聲轉染效率的另一個因素。并被困在核內(nèi)小體中，從這些囊泡結構中釋放出來，進入核周區(qū)域，后進入細胞核。

選擇合適的轉染試劑可能取決于幾個因素，包括轉染核酸的類型和轉染的復雜性(單轉染或共轉染)。一些試劑如Effectene和TransIT-X2是專門用于質粒DNA轉染的，而一些試劑如Lipofectamine RNAiMAX更適合于小寡核苷酸的轉染。哺乳動物原代細胞由于其有限的壽命和有限的擴增能力，通常比其他細胞類型更不容易受到轉染。非脂質體試劑在轉染人原代細胞方面優(yōu)于脂質體試劑，包括PEC、HASMC和HAEC、人原代成肌細胞和AGS。相比之下，據(jù)報道，基于脂質體的試劑(如Lipofectamine和DharmaFECT家族)在轉染其他原代人細胞(如原代臍帶靜脈內(nèi)皮細胞(HUVEC)和BM-MSC方面比非脂質體試劑產(chǎn)生更高的轉染效率。轉染試劑的凍融被認為是另一個可能影響轉染效率的潛在因素。青島轉染試劑效率高

在腺病毒載體或脂質體的全身遞送后，轉基因表達相對短暫。河北DOTAP 轉染試劑

不同種類的納米顆粒轉染細胞系后，產(chǎn)生不同的效率、毒性和組織特異性。這些大量的測試表明，納米顆粒作為載體的效率與普通的非病毒轉染方法相當。Tabatt等人所做的研究比較了使用脂質體、陽離子固體li-pid納米顆粒和兩種商用轉染劑對COS-1細胞系(非洲綠猴腎成纖維細胞樣細胞)使用四種不同的轉染介質所取得的轉染效果。固體脂質na-noparticles轉染組和溶酶體(均由DOTAP -N -(1-(2,3-二聚乙氧基)丙基)-N,N,N-三甲基硫酸銨)轉染組的熒光素酶基因表達效率沒有統(tǒng)計學上的***差異，在每種轉染介質中保持相同水平。然而，獲得的轉染效率低于使用商業(yè)轉染劑EscortTM 的效率，該轉染劑由DOPE(1,2-二-(順式-9-十八烷基)- n-甘油-3-磷酸乙醇胺)組成。研究人員通過在HepG2細胞(人肝細胞肝*細胞系)上使用固體脂質納米顆粒，實現(xiàn)了與市買的lipo-fectamine相同的綠色熒光蛋白和熒光素酶蛋白表達水平。河北DOTAP 轉染試劑