嗜鹽菌選擇性瓊脂是一種專門用于分離和培養(yǎng)嗜鹽菌的培養(yǎng)基,其特點和應(yīng)用如下:1.**成分**:-蛋白胨:20.0g/L-氯化鈉:40.0g/L-結(jié)晶紫:0.0005g/L-瓊脂:17.0g/L-pH值:8.7±0.1(25℃)2.**檢驗原理**:-蛋白胨提供氮源和碳源,支持微生物生長。-高含量的氯化鈉創(chuàng)造高滲環(huán)境,有利于嗜鹽菌的生長,同時抑制不耐高鹽的細(xì)菌。-結(jié)晶紫抑制革蘭氏陽性菌的生長。-瓊脂作為凝固劑,使培養(yǎng)基凝固成固體。-高pH值有助于抑制部分雜菌的生長。3.**配制方法**:-稱取77.0g培養(yǎng)基粉末,加熱攪拌溶解于1000mL蒸餾水中。-分裝后,121℃高壓滅菌15分鐘,備用。4.**使用方法**:-將培養(yǎng)基傾注成平板,待凝固后使用。-接種樣品后,放置于36±1℃恒溫培養(yǎng)箱中需氧培養(yǎng)18-24小時。5.**細(xì)菌生長特征**:-副溶血性弧菌ATCC17802:無色菌落,較濕潤。-溶藻弧菌ATCC17749:無色菌落。-金黃色葡萄球菌ATCC25923:抑制生長。6.**微生物靈敏度試驗**:-按標(biāo)簽用法制備培養(yǎng)基,接種質(zhì)控菌株,放置于36±1℃需氧培養(yǎng)18-24小時。-回收率計算時,用TSA瓊脂做對照培養(yǎng)基。PK瓊脂培養(yǎng)基用于培養(yǎng)和分離特定的微生物,如腸道桿菌等。它也可用于微生物的鑒定,通過觀察菌落形態(tài)等。TSA平板
四號瓊脂基礎(chǔ)(No.4AgarBase)是一種用于微生物培養(yǎng)的培養(yǎng)基,主要用于霍亂弧菌的選擇性分離培養(yǎng)。以下是它的一些主要特點和使用方法:1.**成分**:-蛋白胨:20.0g/L-牛肉浸粉:5.0g/L-氯化鈉:5.0g/L-無水亞硫酸鈉:3.0g/L-十二烷基硫酸鈉:0.5g/L-豬膽粉:5.0g/L-利凡諾:0.03g/L-慶大霉素:500U/L-瓊脂:15.0g/L-pH值:8.5±0.2(25℃)2.**檢驗原理**:-蛋白胨和牛肉浸粉提供碳氮源、維生素和生長因子;-氯化鈉維持均衡的滲透壓;-亞硫酸鈉可刺激弧菌生長;-十二烷基硫酸鈉、豬膽粉、利凡諾、慶大霉素和亞碲酸鉀及較高的pH值可抑制革蘭氏陽性菌和部分革蘭氏陰性雜菌;-霍亂弧菌對酸性環(huán)境比較敏感,因此該pH值可增強其生長;-瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑。3.**配制方法**:-稱取53.5g干粉培養(yǎng)基,加入1L蒸餾水或去離子水,加熱煮沸充分溶解,冷卻至50℃左右,每500mL培養(yǎng)基加入配套試劑1支(SR0080)(5mg亞碲酸鉀),搖勻立即傾注平皿。4.**使用方法**:-從冷藏柜中取出平板皿,并恢復(fù)至室溫。-將包裝整體送入試驗地點。-試驗或接種。-將平板從潔凈室取出,按規(guī)定的溫度和時間倒置培養(yǎng)。-觀察、計數(shù)。改良Thayer-Martin選擇性瓊脂預(yù)裝培養(yǎng)皿下層培養(yǎng)基成分則包括血消化湯、瓊脂、葡萄糖和酚紅溶液。這些成分為細(xì)菌提供碳源、氮源。
使用TCBS瓊脂進(jìn)行細(xì)菌分離實驗的步驟如下:1.**準(zhǔn)備工作**:-確保實驗室無菌操作條件,穿戴適當(dāng)?shù)膶嶒灧褪痔住?準(zhǔn)備無菌的接種環(huán)、涂布器、無菌吸管和移液器等工具。2.**配制培養(yǎng)基**:-按照培養(yǎng)基包裝上的說明,稱取適量的TCBS瓊脂粉末。-將稱取的TCBS瓊脂粉末加入到適量的蒸餾水中,通常為100mL。-將混合物加熱至沸騰,以確保瓊脂完全溶解。3.**冷卻和傾注平板**:-將溶解好的培養(yǎng)基冷卻至50℃左右(避免過熱,以免殺死細(xì)菌),此時瓊脂應(yīng)該仍然是液體狀態(tài)。-將冷卻的培養(yǎng)基倒入無菌的培養(yǎng)皿中,一般傾注量為15-20mL/平皿。-等待瓊脂凝固,形成固體培養(yǎng)基平板。4.**接種樣品**:-使用無菌操作,將待檢測的樣品涂布或劃線接種到TCBS瓊脂平板上。-可以使用稀釋涂布法、螺旋接種法或其他適當(dāng)?shù)慕臃N方法。5.**培養(yǎng)**:-將接種后的平板倒置,放入恒溫培養(yǎng)箱中。-根據(jù)實驗要求,通常在36±1℃下培養(yǎng)18-24小時。6.**觀察和選擇菌落**:-培養(yǎng)結(jié)束后,觀察平板上的生長情況,記錄不同類型菌落的特征。-選擇性地挑選出特定的菌落,如藍(lán)綠色或黃色菌落,這些可能是目標(biāo)弧菌。
TYC培養(yǎng)基(TryptoneYeastCystineMedium)是一種用于分離口腔中鏈球菌(Streptococcusspp)的選擇性培養(yǎng)基。它的特點包括:1.**成分**:TYC培養(yǎng)基通常包含胰蛋白胨、酵母浸粉、L-胱氨酸、亞硫酸鈉、氯化鈉、磷酸氫二鈉、碳酸氫鈉、無水乙酸鈉和蔗糖等成分,瓊脂作為凝固劑。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值控制在7.3±0.2(25℃),為細(xì)菌提供適宜的生長環(huán)境。3.**應(yīng)用**:TYC培養(yǎng)基用于血鏈球菌的分離,可以添加桿菌肽(0.2U/ml)以增加選擇性;也用于制備變形鏈球菌分離培養(yǎng)基。4.**配制方法**:稱取本品98.0g于1L蒸餾水或去離子水中,加熱煮沸至完全溶解,分裝后在121℃高壓下滅菌15分鐘,滅菌結(jié)束后搖勻,以防瓊脂沉積于器皿底部而凝固。5.**質(zhì)量控制**:通過使用特定的質(zhì)控菌株進(jìn)行測試,可以確保培養(yǎng)基支持目標(biāo)菌株的生長。6.**儲存條件**:未配制的培養(yǎng)基粉末應(yīng)密封保存在陰涼干燥處。7.**結(jié)果觀察**:在TYC培養(yǎng)基上,可以觀察到細(xì)菌的生長情況,用于進(jìn)一步的鑒定和分析。TYC培養(yǎng)基因其高選擇性和特異性,是檢測口腔中鏈球菌污染的重要工具。BHI培養(yǎng)基可用于從臨床標(biāo)本中進(jìn)行需氧細(xì)菌的初步分離,也可用于培養(yǎng)單增李斯特菌、葡萄球菌等。
胰酪胨大豆羊血瓊脂(TSSB)基礎(chǔ)是一種用于微生物學(xué)實驗的培養(yǎng)基,主要用于蠟樣芽孢桿菌的溶血測試實驗。以下是它的一些主要特點:1.**成分**:TSSB基礎(chǔ)的配方包含胰酪胨、植物蛋白胨、氯化鈉、無水磷酸氫二鉀、葡萄糖和瓊脂等。具體成分為每升培養(yǎng)基中包含胰酪胨15.0克、植物蛋白胨5.0克、氯化鈉5.0克、無水磷酸氫二鉀2.5克、葡萄糖2.5克和瓊脂12.0克。2.**pH值**:該培養(yǎng)基的pH值通常調(diào)節(jié)在7.2±0.2(25℃)。3.**滅菌處理**:制備好的培養(yǎng)基需要進(jìn)行121℃高壓滅菌15分鐘。4.**添加劑**:每瓶需配套添加脫纖維羊血使用,以提供紅細(xì)胞,檢測微生物溶血特性。5.**檢驗原理**:胰酪胨、植物蛋白胨在培養(yǎng)基中作為營養(yǎng)物質(zhì)提供菌體生長所需的碳源、氮源、維生素及礦質(zhì)元素等;無水磷酸二氫鈉作為pH緩沖體系;瓊脂作為凝固劑;脫纖維羊血提供紅細(xì)胞,檢測微生物溶血特性。6.**用法**:稱取本品42.0g,加熱攪拌溶解于1000ml蒸餾水中,分裝,每瓶100ml,121℃高壓滅菌15分鐘,冷至45-50℃時,加入5-10ml無菌脫纖維羊血,混勻后傾注平板,備用。7.**質(zhì)量控制和典型特征**:在30-32℃培養(yǎng)18-24小時,蠟樣芽孢桿菌典型特征為在菌落周圍呈現(xiàn)β型完全溶血的溶血環(huán)。TSFA是一種通用的營養(yǎng)培養(yǎng)基,用于各種微生物的培養(yǎng),如細(xì)菌總數(shù)的測定,特別是適用于濾膜法細(xì)菌總數(shù)測定 。厭氧菌瓊脂預(yù)裝培養(yǎng)皿
GAM肉湯培養(yǎng)基廣泛應(yīng)用于菌種的生長、保存和實驗操作。它支持多種微生物的生長,并在菌種冷凍保存中。TSA平板
營養(yǎng)瓊脂方瓶(羅氏瓶)通常是指營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基的一種包裝形式,適合實驗室進(jìn)行微生物培養(yǎng)使用。營養(yǎng)瓊脂是一種基礎(chǔ)培養(yǎng)基,用于非苛養(yǎng)微生物的培養(yǎng),以及在生化或血清學(xué)測試前的質(zhì)量控制和純度檢查。以下是營養(yǎng)瓊脂的典型配方:1.**成分**:-蛋白胨:10.0g/L-牛肉膏粉:3.0g/L-氯化鈉:5.0g/L-瓊脂:15.0g/L-終pH值:7.3±0.2(25℃)2.**配制方法**:-稱取33g營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基粉末,加入1000mL蒸餾水或去離子水。-攪拌加熱煮沸至完全溶解。-分裝到方瓶(羅氏瓶)中,通常分裝量為100mL或500mL。-121℃高壓滅菌15分鐘。3.**使用方法**:-滅菌完成后,取出方瓶并冷卻至大約40-45°C。-如果需要富集,可在滅菌后加入血液或其他生物液體。-在無菌條件下,將培養(yǎng)基倒入無菌的培養(yǎng)皿中或作為液體培養(yǎng)基使用。-培養(yǎng)基凝固后,可將培養(yǎng)皿放置在熱空氣烤箱中,用較低溫度烘烤幾分鐘,以去除使用前培養(yǎng)皿上的任何水分。4.**儲存方法**:-粉末形式的培養(yǎng)基應(yīng)儲存在10至30°C之間,容器需緊密封閉。-制備好的培養(yǎng)基應(yīng)在20-30°C的環(huán)境中儲存。TSA平板