肉浸液肉湯是一種基礎(chǔ)的微生物培養(yǎng)基,其主要特點(diǎn)和制作方法如下:1.**成分**:肉浸液肉湯主要由絞碎牛肉、氯化鈉、蛋白胨和磷酸氫二鉀組成,再加上一定量的蒸餾水。具體配比為:絞碎牛肉500g、氯化鈉5g、蛋白胨10g、磷酸氫二鉀2g、蒸餾水1000mL。2.**制作方法**:首先將絞碎的去筋膜無(wú)油脂牛肉與蒸餾水混合后放冰箱過(guò)夜,除去液面之浮油,隔水煮沸半小時(shí),使肉渣完全凝結(jié)成塊,用絨布過(guò)濾,并擠壓收集全部濾液,加水補(bǔ)足原量。然后加入蛋白胨、氯化鈉和磷酸鹽,溶解后校正pH至7.4~7.6,煮沸并過(guò)濾,分裝燒瓶,121℃高壓滅菌30分鐘。3.**用途**:肉浸液肉湯通常用于培養(yǎng)那些營(yíng)養(yǎng)要求不是特別高的細(xì)菌,如溶血性鏈球菌及其他營(yíng)養(yǎng)要求較高的細(xì)菌的增菌培養(yǎng)(GB/T4789.28-2003中4.1G)。它提供了細(xì)菌生長(zhǎng)所需的氮源、維生素和生長(zhǎng)因子。4.**培養(yǎng)特征**:在肉浸液肉湯中,細(xì)菌可以很好地生長(zhǎng),通常表現(xiàn)為肉湯混濁,這是由于細(xì)菌的代謝活動(dòng)導(dǎo)致的。5.**儲(chǔ)存**:肉浸液肉湯的脫水培養(yǎng)基應(yīng)避光儲(chǔ)存于25℃下陰涼干燥處,開(kāi)過(guò)封的脫水培養(yǎng)基應(yīng)蓋緊瓶蓋注意密封儲(chǔ)存。小牛浸液瓊脂的pH值通常控制在7.4±0.2(25℃),這為微生物生長(zhǎng)提供了適宜的酸堿環(huán)境 。麥康凱瓊脂平板
細(xì)菌固體分離培養(yǎng)基是用于分離和培養(yǎng)細(xì)菌的固體培養(yǎng)基,通常包含瓊脂作為凝固劑。這種培養(yǎng)基能夠?yàn)榧?xì)菌提供穩(wěn)定的生長(zhǎng)環(huán)境,并有助于觀(guān)察微生物的菌落特征。以下是細(xì)菌固體分離培養(yǎng)基的一些關(guān)鍵特點(diǎn):1.**成分**:細(xì)菌固體分離培養(yǎng)基通常包含蛋白質(zhì)來(lái)源(如蛋白胨)、碳源(如葡萄糖)、無(wú)機(jī)鹽(如氯化鈉)和瓊脂等。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值對(duì)細(xì)菌的生長(zhǎng)至關(guān)重要,通常需要調(diào)節(jié)至適宜的pH值,如7.3±0.1(25℃)。3.**滅菌**:培養(yǎng)基在制備過(guò)程中需要進(jìn)行高壓滅菌,通常是121℃滅菌15分鐘或115℃滅菌30分鐘。4.**用途**:主要用于細(xì)菌的分離、計(jì)數(shù)和鑒定。通過(guò)稀釋倒平板法、涂布平板法或平板劃線(xiàn)法等技術(shù),可以從混合的微生物群體中分離出單一的細(xì)菌菌落。5.**保存**:培養(yǎng)基通常在室溫、避光、干燥的條件下保存。6.**操作**:在無(wú)菌條件下操作,避免污染。使用時(shí),將培養(yǎng)基加熱至液態(tài),然后倒入無(wú)菌培養(yǎng)皿中,冷卻凝固后即可用于接種細(xì)菌。7.**菌落特征**:不同種類(lèi)的細(xì)菌在固體培養(yǎng)基上形成的菌落具有特定的形態(tài)特征,如大小、形狀、顏色、邊緣等,這些特征可以用于細(xì)菌的鑒定。改良亮綠瓊脂培養(yǎng)皿卵磷脂和吐溫80的加入使得培養(yǎng)基能夠中和樣品中的防腐劑,這對(duì)于化妝品等含有防腐劑的樣品尤為重要。
半固體儲(chǔ)存培養(yǎng)基是一種在微生物學(xué)研究和細(xì)胞培養(yǎng)領(lǐng)域中扮演重要角色的培養(yǎng)基。它主要用于觀(guān)察微生物的動(dòng)力、菌種的保藏與運(yùn)輸、厭氧菌的培養(yǎng)、菌種鑒定、細(xì)胞培養(yǎng)、噬菌體效價(jià)測(cè)定以及微生物趨化性研究等。半固體培養(yǎng)基通常由液體培養(yǎng)基加入少量凝固劑制成,例如瓊脂的用量在0.2~0.7%之間。在具體應(yīng)用上,半固體培養(yǎng)基可以用于以下方面:1.**微生物動(dòng)力觀(guān)察**:通過(guò)推測(cè)細(xì)菌是否有鞭毛來(lái)進(jìn)行鑒定。2.**菌種保藏與運(yùn)輸**:便于菌種的短時(shí)間保存和長(zhǎng)途運(yùn)輸。3.**厭氧菌培養(yǎng)**:適用于厭氧菌的培養(yǎng),對(duì)于研究厭氧微生物的生長(zhǎng)和代謝至關(guān)重要。4.**菌種鑒定**:通過(guò)觀(guān)察菌落的形態(tài)和生長(zhǎng)特性來(lái)區(qū)分不同的微生物種類(lèi)。5.**細(xì)胞培養(yǎng)**:在細(xì)胞生物學(xué)領(lǐng)域,半固體培養(yǎng)基廣泛應(yīng)用于干細(xì)胞、細(xì)胞克隆、細(xì)胞表達(dá)和細(xì)胞毒性等實(shí)驗(yàn)。6.**噬菌體效價(jià)測(cè)定**:用于雙層平板法測(cè)定噬菌體的效價(jià),是研究病毒與宿主相互作用的重要手段。7.**微生物趨化性研究**:幫助研究微生物的趨化性,即微生物對(duì)化學(xué)物質(zhì)的定向移動(dòng)反應(yīng)。
TCBS瓊脂(ThiosulfateCitrateBileSaltsSucroseAgar)是一種用于分離培養(yǎng)弧菌科細(xì)菌,特別是致病性弧菌的選擇性培養(yǎng)基。以下是它的一些主要特點(diǎn):1.**成分**:-酵母浸粉:5.0g/L-蛋白胨:10.0g/L-硫代硫酸鈉:10.0g/L-枸櫞酸鈉:10.0g/L-牛膽粉:5.0g/L-牛膽酸鈉:3.0g/L-蔗糖:20.0g/L-氯化鈉:10.0g/L-檸檬酸鐵:1.0g/L-溴麝香草酚蘭:0.04g/L-麝香草酚蘭:0.04g/L-瓊脂:15.0g/L-pH值:8.6±0.2(25℃)2.**檢驗(yàn)原理**:-蛋白胨和酵母浸粉提供氮源、碳源及維生素等生長(zhǎng)因子。-氯化鈉提供弧菌嗜鹽生長(zhǎng)的環(huán)境,高濃度抑制其他細(xì)菌生長(zhǎng)。-蔗糖作為可發(fā)酵碳源。-枸櫞酸鈉、高pH值和硫代硫酸鈉抑制革蘭氏陽(yáng)性菌和大腸菌群生長(zhǎng)。-硫代硫酸鈉與檸檬酸鐵反應(yīng),檢測(cè)細(xì)菌產(chǎn)硫化氫。-溴麝香草酚蘭和麝香草酚蘭作為pH指示劑,細(xì)菌利用蔗糖產(chǎn)酸會(huì)使得指示劑變黃。-瓊脂作為凝固劑。3.**使用方法**:-稱(chēng)取8.9g培養(yǎng)基,溶解于100ml蒸餾水中,煮沸后冷卻至50℃,傾入無(wú)菌平皿,備用。-注意:無(wú)需高壓滅菌。4.**不同細(xì)菌在TCBS瓊脂上的生長(zhǎng)特征**:-副溶血性弧菌:藍(lán)綠色斗笠狀菌落,H2S陰性。-溶藻弧菌:黃色菌落,H2S陰性。-霍亂弧菌:黃色菌落,H2S陰性。
支原體培養(yǎng)基基礎(chǔ)(含精氨酸)是一種專(zhuān)門(mén)用于培養(yǎng)支原體的培養(yǎng)基,它包含精氨酸作為生長(zhǎng)因子,適用于那些需要精氨酸才能生長(zhǎng)的支原體,如口腔支原體等。以下是該培養(yǎng)基的一些特點(diǎn)和配制方法:1.**配方組成**:通常包含豬胃消化粉、牛肉浸粉、酵母浸粉、氯化鈉、葡萄糖、L-精氨酸和酚紅等成分。2.**配制方法**:-稱(chēng)取培養(yǎng)基粉末,按照說(shuō)明書(shū)比例(通常是25.52g/L)溶解在蒸餾水中。-加熱溶解并調(diào)節(jié)pH至7.1-0.2(25℃)。-121℃高壓滅菌15分鐘。-冷卻至室溫后,無(wú)菌操作下加入滅活小牛血清或馬血清(通常為200mL)和青霉素(通常為80萬(wàn)單位)。-混勻后分裝到無(wú)菌試管中備用。3.**用途**:主要用于藥品和生物制品中支原體的檢測(cè),特別是口腔支原體的培養(yǎng)和檢測(cè)。4.**培養(yǎng)條件**:通常在36℃±1℃的條件下培養(yǎng)7-14天。5.**觀(guān)察指標(biāo)**:培養(yǎng)基中的酚紅作為pH指示劑,支原體生長(zhǎng)時(shí)會(huì)因代謝產(chǎn)物改變培養(yǎng)基的pH值,導(dǎo)致顏色變化。例如,口腔支原體分解精氨酸產(chǎn)堿,使培養(yǎng)基顏色由橙色變?yōu)榧t色。6.**質(zhì)量控制**:通過(guò)接種已知的質(zhì)控菌株來(lái)驗(yàn)證培養(yǎng)基的靈敏度和有效性。水瓊脂培養(yǎng)基的凝膠結(jié)構(gòu)在不同溫度下可能會(huì)發(fā)生變化,因此需要根據(jù)微生物的特性調(diào)控培養(yǎng)溫度。膽鹽氯酚紅亮綠瓊脂預(yù)裝培養(yǎng)皿
由于雙歧桿菌是厭氧菌,PYG培養(yǎng)基需要在厭氧或微需氧條件下使用,以確保細(xì)菌的正常生長(zhǎng) 。麥康凱瓊脂平板
DPD培養(yǎng)基(DPDMedium)是一種用于植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基,其特點(diǎn)是全無(wú)機(jī)鹽配方,適用于多種植物細(xì)胞的培養(yǎng)。以下是DPD培養(yǎng)基的一些關(guān)鍵特點(diǎn):1.**成分**:DPD培養(yǎng)基包含多種無(wú)機(jī)鹽和有機(jī)物,如硝酸銨、硫酸鉀、硫酸鎂、氯化鈣、硫酸二氫鉀、硫酸亞鐵、乙二胺四乙酸二鈉(EDTA二鈉)、硫酸錳、鉬酸鈉、硼酸、硫酸鋅、硫酸銅、氯化鈷、碘化鉀、煙酸、鹽酸吡哆醇、鹽酸硫胺素、肌醇、葉酸、甘氨酸、生物素、蔗糖、甘露醇、2,4-D和激動(dòng)素等。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值調(diào)整至5.8,以滿(mǎn)足植物細(xì)胞生長(zhǎng)的需要。3.**用途**:DPD培養(yǎng)基主要用于植物組織的培養(yǎng),包括植物細(xì)胞、組織的生長(zhǎng)和發(fā)育。4.**配制方法**:通常稱(chēng)取一定量的DPD培養(yǎng)基粉末,加熱溶解于蒸餾水中,分裝后進(jìn)行高壓滅菌。5.**保存條件**:DPD培養(yǎng)基的保質(zhì)期通常為三年,應(yīng)避光、干燥保存,或根據(jù)需要保存于2-8°C。6.**注意事項(xiàng)**:在使用時(shí),應(yīng)檢查培養(yǎng)基是否有顏色變化、蒸發(fā)/脫水情況或微生物生長(zhǎng)。培養(yǎng)基融化后應(yīng)立即使用,避免重復(fù)融化和長(zhǎng)時(shí)間放置。7.**用法**:在使用前,需要調(diào)整pH值至5.8,并進(jìn)行高壓滅菌處理。DPD培養(yǎng)基因其成分穩(wěn)定和適用性廣,在植物組織培養(yǎng)領(lǐng)域有著廣泛的應(yīng)用。 麥康凱瓊脂平板