與常規(guī)的PCR的方法相比,dPCR有很好的優(yōu)勢。
***定量
常規(guī)PCR和實時熒光PCR定量檢測都需要已知拷貝數(shù)的標準DNA制定標準曲線,由于樣品測定在各種條件上不會完全一致,會造成PCR擴增效率的差異,從而影響定量結(jié)果的準確性。而ddPCR不受標準曲線和擴增動力學影響,可以進行***定量。
樣品需求量低
在檢測珍貴樣品和樣品核酸存在降解時具有明顯的優(yōu)勢。
高靈敏度
ddPCR本質(zhì)上是將一個傳統(tǒng)的PCR反應分成了數(shù)萬個**的PCR反應,在這些反應中可以精確地檢測到很小的目的片段的差異、單拷貝甚至是低濃度混雜樣品,且能避免非同源異質(zhì)雙鏈的形成。
高耐受性
由于目的序列被分配到多個微滴中,***降低了體系間的影響以及背景序列和***物對反應的干擾,擴增基質(zhì)效應大大減小。 開放式平臺,支持用戶自行開發(fā)試劑、產(chǎn)品。蘇州數(shù)字PCR代理商
MicroDrop-100系統(tǒng)產(chǎn)品特點
一、適應性廣,靈活性高
1、理論上可覆蓋qPCR(熒光定量PCR)的所有應用
2、樣本多樣性,樣本通量可達96個樣本,支持靈活設定
3、開放式平臺,支持用戶自行開發(fā)試劑、產(chǎn)品。
二、靈敏度高,準確性高
1、***定量——無需依賴標準曲線
2、采用微滴式技術高達100,000個的微滴
3、線性范圍達到6個數(shù)量級,靈敏度高達萬分之一
三、可分析復雜混合物
1、準確度不完全依賴于擴增效率
2、雙通道熒光檢測,支持EvaGreen染料及探針法
3、支持多重數(shù)字PCR
四、操作簡單,使用方便
1、全封閉防污染設計,一鍵式自動化操作。
2、可選全中文分析軟件 南通永諾數(shù)字PCR代理商MiniDrop?研發(fā)團隊由微流控、光學、機電學、化學、臨床醫(yī)學、分子生物學等多學科交叉領域的**組成。
數(shù)字PCR為juedui定量,qPCR為相對定量,數(shù)字PCR較qPCR更精細、更靈敏。所以說,未來數(shù)字PCR將成為qPCR的重要補充,在部分領域逐步替代熒光定量PCR。
未來這些領域?qū)V泛應用到數(shù)字PCR:
科研:高校(生命科學學院、環(huán)境學院、醫(yī)學院、藥學院)等。
醫(yī)院:病理科、血液科、婦產(chǎn)科、心血管科、檢驗科、轉(zhuǎn)化醫(yī)學中心
:研究院單位、疾控中心、海關(出入境檢驗檢疫)、質(zhì)監(jiān)局、環(huán)境/環(huán)保局等。
企業(yè):第三方檢測機構、IVD(分子體外診斷試劑)、生物制藥等。
相對于二代測序、基因芯片和定量PCR而言,數(shù)字PCR具備以下優(yōu)勢:
· 能夠有效區(qū)分濃度差異微小的樣品:更好的準確度、精密度和重復性,可以用于精確測定靶基因的相對表達,基因拷貝數(shù)變異分析等。
· 數(shù)字PCR可開發(fā)針對不同**、不同樣本以及不同的樣本環(huán)境提供檢測解決方案,該技術的應用范圍廣,尤其在液體活檢領域,已開發(fā)針對肺*、乳腺*、腸*、胃*等上百個位點檢測試劑盒,可精細指導臨床***的診斷,以便患者在后續(xù)得到更及時并且適當?shù)?**方案提供。 液體活檢:早篩、用藥、監(jiān)測、復發(fā)。
研究方向
無創(chuàng)產(chǎn)前篩查
無創(chuàng)傷的產(chǎn)前診斷, 如21號染色體為3倍體的唐氏綜合征、已知父母基因型的胎兒地貧檢測或已知父母基因型的其它核酸病檢測(孟德爾相關遺傳疾病)。目前標本來源主要為血液,而待檢測的胎兒DNA受到母體DNA的干擾,影響了檢測的準確性。而QX200檢測系統(tǒng)獨特的微滴化技術完全可以作為二代測序法的補充來進行的無創(chuàng)傷產(chǎn)前診斷,從而提高工作效率及節(jié)約成本。
轉(zhuǎn)基因食品或成分的檢測
目前在確定轉(zhuǎn)基因作物或成分的含量時采取定量PCR的標準曲線法,這種方法需要依賴于已知濃度的標準品(Certified Reference Materials Calibrants, CRMCs)。ddPCR***定量的方式可以徹底解決這些標準物質(zhì)的定標工作。 準確度不完全依賴于擴增效率。蘇州微流控芯片數(shù)字PCR代理商
樣本多樣性,樣本通量可達96個樣本,支持靈活設定。蘇州數(shù)字PCR代理商
定量PCR和數(shù)字PCR的特點:
5. 目前定量PCR已經(jīng)能實現(xiàn)高通量樣品條件下的自動化操作。
6. 數(shù)字PCR在單分子層面上的***定量,可以徹底擺脫對標準曲線的依賴而直接給出靶序列的拷貝數(shù),提高了實驗結(jié)果在批內(nèi)和批間的穩(wěn)定性,甚至能用來對標準品進行定標。
7. 基于***定量的方式,數(shù)字PCR結(jié)果的高重復性和高精度可實現(xiàn)微小差異的基因表達分析,如等位基因的不平衡表達、單細胞基因表達分析、microRNA表達分析等等。所謂“微小差異”的標準一般而言是指表達水平的差異在2倍以內(nèi)。
8. 同等條件下,數(shù)字PCR在靈敏度方面擁有優(yōu)勢,使得該技術已成為**的液態(tài)活檢、病原微生物檢測、轉(zhuǎn)基因成分測定、宿主殘留DNA分析等的熱門技術。
浚和(上海)儀器有限公司是一家供應國內(nèi)外先進儀器和設備的專業(yè)供應商和服務商,致力于為客戶提供專業(yè)的定制化解決方案。多年來,持續(xù)為醫(yī)藥、化工、高校、科研單位、檢測院等多個行業(yè)提供先進的產(chǎn)品和專業(yè)的服務。
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公司主要經(jīng)營產(chǎn)品包括:等離子清洗機、真空泵、噴霧干燥器、數(shù)字PCR、高壓滅菌鍋、培養(yǎng)箱、切片機、水分測定儀、激光粒度儀、光譜儀、溫濕度記錄儀等,目前主要合作品牌有:日本雅馬拓YAMATO、日本KASHIYAMA、日本HORIBA、廣州永諾 、日本KEM等。同時,公司還提供專業(yè)的技術服務,如設備的維護、驗證等。
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