參考原理：血液中單個蛋白質(zhì)分子的檢測有助于識別許多新的診斷性蛋白質(zhì)標記物。我們報告了一種同時檢測數(shù)百至數(shù)千個單獨蛋白質(zhì)分子的方法，該方法能夠檢測到非常低濃度的蛋白質(zhì)。蛋白質(zhì)被捕獲在顯微珠上，并用酶標記，每個顯微珠上有一個或零個酶標記的蛋白質(zhì)。通過將這些顯微珠分離成50飛米的陣列反應室，單個蛋白質(zhì)可以通過熒光想象檢測到。通過單化這些陣列中的分子，~10-20種酶可以在100μL（~10?19M）中檢測到。單個基于酶標記的分子酶聯(lián)免疫吸附試驗（數(shù)字ELISA)能夠檢測血清中臨床相關的蛋白質(zhì)，其濃度（<10?15M）遠低于傳統(tǒng)ELISA3-5。數(shù)字ELISA在所有接受防冶性前列腺切除術的患者血清中檢測到前列腺特異性抗原，比較低至14fmol/mL（0.4fmol）。

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芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA產(chǎn)品基本原理同somoa類似，

技術開創(chuàng)性領頭產(chǎn)品：simoa單分子蛋白檢測技術；

芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA產(chǎn)品參考simoa原理；Simoa®由現(xiàn)任于哈佛大學醫(yī)學院的DavidWalt教授作為科學創(chuàng)始人于2007年創(chuàng)立。DavidWalt是美國的工程院，藝術院和醫(yī)學院三院院士。2010年，DavidWalt將Simoa®技術以封面文章的形式發(fā)表在《NatureBiotechnology》上，此技術開始為大眾所知并引起業(yè)界轟動。 醫(yī)學實驗室數(shù)字ELISA芯片芯棄疾JX-8B單分子小型化ELISA檢測產(chǎn)品，多重檢測，同一樣本就能測試2-6項指標；

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單分子的檢測原理：由Simoa數(shù)字免疫分析法實現(xiàn)的超靈敏度已在先前討論過。簡而言之，類似免疫分析中的酶-底物反應是在相對較大的反應體積（50-100μL）中進行的，在信號生成步驟中稀釋了產(chǎn)物分子。信號分子的擴散和稀釋將靈敏度限制在皮摩爾范圍內(nèi)。相比之下，Simoa通過將單獨標記的免疫復合物和底物限制在飛升大小的孔中，從而限制了熒光產(chǎn)物分子從酶-底物反應中的擴散。當單一酶標簽催化底物轉(zhuǎn)化為熒光產(chǎn)物時，產(chǎn)生的熒光團被限制在孔中，從而在短時間內(nèi)產(chǎn)生可測量的熒光信號。

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每個生物實驗室都用得起的單分子免疫檢測

我們已經(jīng)開發(fā)了兩種臨床相關蛋白的檢測方法——前列腺特異性抗原（PSA）和腫瘤壞死因子α（TNF-α），以確定高酶標記物單體提供的靈敏度轉(zhuǎn)化為高靈敏度的檢測方法血液中的蛋白質(zhì)。兩種蛋白質(zhì)的數(shù)字ELISA如圖1所示。開發(fā)這些試驗的關鍵參數(shù)是：珠子濃度和兩種標記試劑（檢測試劑和酶偶聯(lián)物）的濃度。珠子濃度的選擇取決于幾個相互競爭的因素。首先，足夠的珠子必須在場以從熱力學和動力學中捕獲大部分目標分析物從熱力學角度看，100μL中有20萬個珠子，每個珠子大約有8萬個與之結(jié)合的抗體25相當于約0.3nM的抗體濃度，在該濃度下，抗體-蛋白平衡導致高捕獲效率（>70%）(D.M.R.，E.P.F.，D.C.D.，未發(fā)表工作）。 芯棄疾單分子ELISA檢測試劑盒，多重超敏檢測，多重指標也能檢測到亞皮克級！

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數(shù)字ELISA測量蛋白質(zhì)濃度遠低于傳統(tǒng)ELISA的能力源于兩種效應：1）SiMoA對酶標記的高度敏感性；以及2）通過數(shù)字化蛋白質(zhì)檢測可以實現(xiàn)的低背景信號。任何免疫測定的靈敏度由其靈敏度決定。檢測技術到標簽，抗體親和力，試驗背景，以及背景測量值的變異（%CV）27.SiMoA對酶非常敏感標簽（圖2）為在數(shù)字ELISA中檢測亞飛摩爾濃度的標記蛋白提供了基礎。也就是說，對于給定親和力的抗體，其靈敏度為免疫測定將由測定背景決定，SiMoA的高標記靈敏度有助于降低這種背景。對照實驗表明，數(shù)字ELISA的背景來自于檢測抗體和酶的非特異性結(jié)合（NSB）與捕獲珠表面結(jié)合（補充表2）。AsSiMoA相比傳統(tǒng)檢測方法具有更高的標記靈敏度，明顯減少了檢測抗體（~1nM)和酶標記物（1–50pM)的需要，以檢測結(jié)合事件，與傳統(tǒng)方法相比（標記試劑濃度~10nM)。降低的標記物濃度減少了NSB到捕獲表面，從而導致背景信號明顯降低。 芯棄疾JX-8B簡易版單分子ELISA檢測產(chǎn)品，極速檢測，檢測用時只需要 15-30min！生物實驗室數(shù)字ELISA檢測速度快

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    創(chuàng)新性的解決方案：芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA應用范圍：各種高靈敏多重免疫檢測，可替代各種ELISA試劑盒，及其他免疫檢測產(chǎn)品。循環(huán)血液轉(zhuǎn)化為~2×10?15M（或2飛摩爾，fM)；早期HIV傳染血清中每mL含有10-3000個病毒顆粒，相當于p24抗原濃度范圍為從50×10?18M（50attomolar，aM)到15×10?15M（15fM）10.嘗試開發(fā)能夠測量這些蛋白質(zhì)濃度的方法集中在蛋白質(zhì)上的核酸標記復制，11,12或測量整體、結(jié)合標記蛋白分子的性質(zhì)13-16。Mirkin等人12,17及其他研究者18使用基于金納米顆粒和DNA生物條形碼的標記物，已將蛋白質(zhì)的檢測范圍擴展至低飛摩爾水平；更近使用該技術的一篇報道展示了檢測到10飛摩爾PSA插入物17。這些方法所達到的靈敏度然而，檢測蛋白質(zhì)仍然落后于核酸，如聚合酶鏈反應（PCR），從而限制了蛋白質(zhì)組中具有已在血液中檢測到6,19。單個蛋白質(zhì)分子的分離和檢測為測量極低濃度的蛋白質(zhì)s1,2提供了一種有希望的方法。 醫(yī)療檢測數(shù)字ELISA靈活