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內蒙古免疫組化推薦

來源: 發(fā)布時間:2024-05-26

確定來源不明的轉移瘤的原發(fā)部位,臨床上免疫組化也可以進行操作。對于來源不明的轉移瘤,用免疫組化技術有助于確定惡性cancer的組織學來源,進一步確定原發(fā)部位。如角蛋白抗體(CK20)在胃腸道cancer、膽管cancer、胰腺cancer中陽性,而在肺cancer、乳腺cancer、腎cancer中陰性;Tg陽性可考慮甲狀腺轉移;波形蛋白(Vimentin)陽性支持肉瘤的診斷;前列腺特異性抗原(PSA)陽性可考慮前列腺轉移;甲狀腺球蛋白陽性可考慮甲狀腺濾泡細胞cancer;肌動蛋白(Actin)、肌球蛋白(Myosin)、結蛋白(Desmin)、肌紅蛋白(Myoglobin)陽性可考慮橫紋肌肉瘤;S-100蛋白陽性支持黑色素瘤的診斷;等等這些都為cancer的醫(yī)療及預后提供了依據。有沒有做免疫組化比較好的公司?內蒙古免疫組化推薦

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實驗失敗常見問題分析有哪些:

為什么在顯微鏡下觀察發(fā)現(xiàn)所有的切片都成陰性?

答:這種現(xiàn)象主要是由操作不當導致,可能的原因有:1.染色操作不當,致使染色失?。?.漏加一種抗體或者制備出的抗體沒有活性;3.緩沖液中有疊氮化鈉,抑制了酶的活性;4.復染或脫水劑使用不當等。建議逐一排查,找到原因后重新進行實驗。

在顯微鏡下觀察發(fā)現(xiàn)所有的切片都成陽性,這是為什么?答:與上一個問題類似,出現(xiàn)的原因也是試驗操作存在問題,可能的原因有:1.切片在染色過程中抗體過濃,或者干片了;使用的呈色底物溶液已變色或呈色反應時間過長;3.抗體溫育的時間過長等。

在顯微鏡下觀察發(fā)現(xiàn)切片的背景很深,這是為什么?答:以下幾方面會導致切片的背景過深:1.蛋白質封閉不夠或所用血清溶血,造成抗體的非特異性反應;2.內源性過氧化酶沒有完全阻斷,顯色過程中過氧化酶與酶底物反應,造成背景;3.底物呈色反應時間過長或呈色反應后漂洗不徹底。 安徽免疫組化多少錢關于免疫組化,你想知道的都在這里!

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免疫組化在什么情況下進行組織抗原修復,抗原修復的條件是什么? 

(1)由于組織中部分抗原在甲醛或多聚甲醛固定過程中,發(fā)生了蛋白之間交聯(lián)及醛基的封閉作用,從而失去抗原性。通過抗原修復,使得細胞內抗原決定族重新暴露,提高抗原檢測率。

(2)修復方法從強到弱一般分為三種,高壓修復、微波修復、胰酶修復。修復液也分為若干種(具體的可以查閱相關資料,大量的:中性的、高pH的等)。

(3)微波修復,我們一般用6min*4次,效果不錯。

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免疫組化的發(fā)展路程?在臨床病理診斷中,免疫組織化學(IHC)是一種很重要的技術和手段,從20世紀70年代開始,免疫組化技術就應用于病理診斷,對于診斷cancer、cancer分類、判斷預后產生了巨大的影響,同時也擴展了人們對于各種疾病及cancer形成過程的認識,提高了病理診斷與研究水平。但是,隨著免疫組化的廣泛應用,發(fā)現(xiàn)免疫組化技術存在一些局限性。深入研究免疫組化原理和技術,必須熟悉各種抗體真陽性反應部位,實現(xiàn)實驗室間免疫組化標準化,使免疫組化在病理診斷中發(fā)揮比較大的輔助作用。如果您有免疫組化相關的實驗,可以與我們英瀚斯生物進行聯(lián)系。病理免疫組化多少錢?

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免疫組化結果背景染色較深的原因有哪些?

 (1)抗體濃度過高:一抗?jié)舛冗^高是常見的原因之一。解決辦法是,每次使用新抗體前應當對其工作濃度進行測試,使每一抗體個體化,找到適合自己實驗室的理想工作濃度,既使是即用型的抗體也應如此,不能只簡單的按說明書進行染色。

(2)抗體孵育時間過長或溫度較高:解決辦法是,嚴格執(zhí)行操作規(guī)程,比較好隨身佩帶報時表或報時鐘,及時提醒,避免因遺忘而造成時間延長?,F(xiàn)在流行的二步法(Polymer)敏感性很高,要求一抗孵育的時間不是傳統(tǒng)的1小時,而是30分鐘,因此,要根據染色結果進行調整。 

(3)DAB變質和顯色時間太長:DAB比較好現(xiàn)用現(xiàn)配,如有沉渣應進行過濾后再用。配制好的DAB不應存放時間太長,因為在沒有酶的情況下,過氧化氫也會游離出氧原子與DAB產生反應而降低DAB的效力,未用完的DAB存放在冰箱里幾天后再用這種似乎節(jié)約的辦法是不可取的。DAB的顯色比較好在顯微鏡下監(jiān)控,達到理想的染色程度時立即終止反應。但是當染**太多時或用染色機時,這樣做似乎不現(xiàn)實,但至少應對一些新的或少用的抗體顯色時進行監(jiān)控,避免顯色時間過長。

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關于免疫組化的封閉:用和二抗來源一致的血清在保濕盒中于37℃孵育15~30min,然后甩去封閉用血清,勿洗;注意:封閉時間根據具體實驗調整;封閉液一般選用5%BSA或與二抗來源一致的血清,切記是BSA,不是PBS.很多論壇寫的是PBS,太坑了。①使用血清好還是BSA好?答:***是待檢樣本會非特異性的和蛋白結合,從而導致背景過高,因此可以用BSA或血清封閉掉這部分非特異性的結合,從這點看,BSA和血清沒有明顯區(qū)別。第二是待檢樣本中可能會有Fc受體,可以和抗體恒定區(qū)結合,與抗體特異性無關,封閉血清中有抗體,因此用血清可以封閉掉一抗及二抗和樣本Fc受體之間結合。BSA則無法封閉Fc受體。內蒙古免疫組化推薦